Fille de Laurent II de Médicis (1492-1519), duc d'Urbino, et de Madeleine de la Tour d'Auvergne (1495-1519), elle grandit en Italie d'où elle était originaire de par son père. À la mort de ses parents, elle hérita les titres de comtesse d'Auvergne et de duchesse d'Urbino. Mère de François II, Charles IX, et d'Henri III, elle gouverna la France en tant que reine-mère et fut régente de France de 1560 à 1564